Pfu DNA polimerasi (senza Mg2+) n. P1021, 250u

Model No.
P1021
Capacità di Produzione
100 Bag/Bags Per Day
Prezzo di riferimento
$ 26.10 - 62.10
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Descrizione del Prodotto

Pfu DNA   polimerasi
N. P1021 , 250U
 
Concentrazione: 2,5 U / μl
Contenuto :
Pfu   DNA polimerasi 100   μl
 Tampone Pfu da 10× ( Mg2 +   libero)   1.25 ml
6 ×   buffer di caricamento 1   ml
25 mm MgCl2 1.25 ml



Conservare a -20°C.
Solo per uso di ricerca .
Pfu DNA Polymerase (Mg2+ Free) #P1021, 250u
Descrizione
La pfu DNA polimerasi, derivata dagli archi ipertermilici Pyrococcus furiosus, ha proprietà di termostabilità e di correzione superiori rispetto ad altre polimerasi termostabili.   Il suo peso molecolare è di 90 kDa .  Può amplificare il bersaglio di DNA fino a 2  kb (stampo semplice) . La velocità di allungamento è 1 kb /min (70~75 °C ) .   La DNA polimerasi pfu possiede un'attività di correzione dell'esonucleasi 3' a 5' che consente alla polimerasi di correggere errori di incorporazione di nucleotidi. Ciò significa che i frammenti di PCR generati da DNA polimerasi Pfu avranno meno errori rispetto agli inserti di PCR generati da Taq. L'uso della DNA polimerasi Pfu nelle reazioni PCR produce prodotti PCR a estremità smussate, ideali per la clonazione in vettori a estremità smussate. La DNA polimerasi pfu è superiore per tecniche che richiedono sintesi di DNA ad alta fedeltà.
Definizione unità
Una unità è definita come la quantità dell'enzima necessaria per catalizzare l'incorporazione di 10 nmoli di dNTP in una forma insolubile in acido in 30 minuti a 70°C usando DNA di sperma di ering come substrato.
Buffer di archiviazione
20 mm Tris -HCl (pH   8.0) , 100 mm KCl , 3 mm MgCl2 , 1 mm DTT , 0.1% NP-40 ,   0.1% Tween 20 , 0,2 mg/ml   BSA , 50% (V/V) glicerolo .
Applicazioni
• reazioni PCR ad alta fedeltà e di estensione del primer
• PCR ad alta fedeltà per la clonazione in vettori a estremità smussate
• mutagenesi sito-diretta

Controllo qualità
L'assenza di endodesossiribonucleasi, esodesossiribonucleasi e ribonucleasi è confermata da adeguate prove di qualità. Funzionalmente testato nell'amplificazione di un gene a copia singola da DNA genomico umano.
Dosaggio per endodesossiribonucleasi
Non è stata osservata alcuna conversione rivelabile di DNA circolare chiuso covalentemente ad un DNA intaccato dopo incubazione di DNA    polimerasi di Pfu 10U  con DNA di pBR322 1μg per 4 ore a 37°C e 70°C.
Saggio di esodeossiribonucleasi
Non è stata osservata alcuna degradazione rilevabile di frammenti lambda DNA-HindIII dopo incubazione di  DNA polimerasi di Pfu 10U  con   DNA digerito con 1μg per 4 ore a 37°C e 70°C.
Saggio di ribonucleasi
0% della radioattività totale è stata rilasciata nella frazione solubile in acido tricloroacetico dopo incubazione di DNA polimerasi di Pfu 10U  con E.   coli [3H]-RNA 1μg (40000 cpm/μg)   per 4 ore a 37°C  e 70°C.



Pfu DNA Polymerase (Mg2+ Free) #P1021, 250u
Pfu DNA Polymerase (Mg2+ Free) #P1021, 250u Pfu DNA Polymerase (Mg2+ Free) #P1021, 250u
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